OriMAbs酵母分泌表達(dá)載體介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):pYS1
產(chǎn)品貨號(hào):mAb004
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:在通過(guò)磁性和流式分選富集抗原特異性酵母展示群體后,可以使用流式細(xì)胞術(shù)鑒定高親和力的單個(gè)scFc克隆。然而,這是耗時(shí)和費(fèi)力的,并且顯示的scFv稍后需要轉(zhuǎn)化為可溶性形式以進(jìn)行親和性和其他表征。如果將顯示的scFv轉(zhuǎn)化為可溶性scFv,然后使用高通量ELISA來(lái)鑒定單個(gè)克隆,將是更有效的。載體pYS1和pYS2,pYDS1、pYDS1.1和pYDS2的對(duì)應(yīng)物,被設(shè)計(jì)用于可溶性scFv的表達(dá)。使用PCR從富集的展示酵母群體中簡(jiǎn)單擴(kuò)增scFv基因,并與線(xiàn)性化載體pYS1、pYS1.1或pYS2共轉(zhuǎn)化為YVH10酵母菌株,挑選單個(gè)克隆,在96個(gè)深孔板中培養(yǎng)和誘導(dǎo),含scFv的上清液即可用于ELISA鑒定。陽(yáng)性克隆可以從96孔的儲(chǔ)備中擴(kuò)增出來(lái)用于大規(guī)模scFv純化以進(jìn)行進(jìn)一步表征。載體pYS1與pYDS1和pYDS1.1配對(duì)用于單體scFv表達(dá),pYS2與pYDS2配對(duì)用于二聚體scFv表達(dá)。
產(chǎn)品名稱(chēng):pYS2
產(chǎn)品貨號(hào):mAb005
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:在通過(guò)磁性和流式分選富集抗原特異性酵母展示群體后,可以使用流式細(xì)胞術(shù)鑒定高親和力的單個(gè)scFc克隆。然而,這是耗時(shí)和費(fèi)力的,并且顯示的scFv稍后需要轉(zhuǎn)化為可溶性形式以進(jìn)行親和性和其他表征。如果將顯示的scFv轉(zhuǎn)化為可溶性scFv,然后使用高通量ELISA來(lái)鑒定單個(gè)克隆,將是更有效的。載體pYS1和pYS2,pYDS1、pYDS1.1和pYDS2的對(duì)應(yīng)物,被設(shè)計(jì)用于可溶性scFv的表達(dá)。使用PCR從富集的展示酵母群體中簡(jiǎn)單擴(kuò)增scFv基因,并與線(xiàn)性化載體pYS1、pYS1.1或pYS2共轉(zhuǎn)化為YVH10酵母菌株,挑選單個(gè)克隆,在96個(gè)深孔板中培養(yǎng)和誘導(dǎo),含scFv的上清液即可用于ELISA鑒定。陽(yáng)性克隆可以從96孔的儲(chǔ)備中擴(kuò)增出來(lái)用于大規(guī)模scFv純化以進(jìn)行進(jìn)一步表征。載體pYS1與pYDS1和pYDS1.1配對(duì)用于單體scFv表達(dá),pYS2與pYDS2配對(duì)用于二聚體scFv表達(dá)。
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